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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞復(fù)蘇/凍存兔胰腺星狀細(xì)胞
兔胰腺星狀細(xì)胞

產(chǎn)品簡介

兔胰腺星狀細(xì)胞胰腺進(jìn)行性纖維化是慢性胰腺炎典型的病理表現(xiàn),在這個(gè)過程中扮演中心角色的是一種多角形或星狀細(xì)胞,即胰腺星狀細(xì)胞。胰腺星狀細(xì)胞分布在胰腺小葉間和腺泡間,在胰腺纖維化過程中,其被多種病理因子激活,分泌多種細(xì)胞外基質(zhì),包括膠原、啟動(dòng)和促進(jìn)了纖維化這一病理過程。正常情況下,胰腺星狀細(xì)胞處于非激活的靜止期狀態(tài),球形。當(dāng)胰腺受損傷或者受到細(xì)胞生長因子等刺激后轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ顮顟B(tài)。

產(chǎn)品型號:復(fù)蘇/凍存
更新時(shí)間:2025-07-01
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪問量:483
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兔胰腺星狀細(xì)胞

產(chǎn)品名稱 :兔胰腺星狀細(xì)胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB1038h

組織來源 :胰腺組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


細(xì)胞簡介:

胰腺星狀細(xì)胞分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸/氫鈉、胰蛋白/酶原、脂肪酶、淀粉/酶等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,胰島主要由 4 種細(xì)胞組成:α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及 PP 細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細(xì)胞分泌胰島素,降低血糖;γ細(xì)胞分泌生長/抑素,以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌;PP 細(xì)胞分泌胰多肽,抑制胃腸運(yùn)動(dòng)、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征,活化的胰腺星狀細(xì)胞(PSC )是胰腺纖維化的主要效應(yīng)細(xì)胞,PSC 分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提。

未活性化的 PSC 胞漿中富含維 A 脂滴,并表達(dá) D esmin 蛋白,活化后的 PSC 則表達(dá)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(alp h a-SM A )。PSC 具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種,并分別具有特異的標(biāo)志物。靜息狀態(tài)PSC 胞質(zhì)內(nèi)富含的維生素A 脂滴可以被油紅O 染成紅色,陽性表達(dá)D esmin。激活狀態(tài) PSC 陽性表達(dá) alp h a-SM A 。油紅 O 染色發(fā)現(xiàn),原代分離的細(xì)胞培養(yǎng) 6d,胞漿中仍可見明顯的脂滴,傳代后,橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示,細(xì)胞接種 24h 仍然表達(dá) D esmin,48h 后 D esmin 基本不再表達(dá)。

培養(yǎng) 48h 后絕大多數(shù)細(xì)胞開始表達(dá) alp h a-SM A,隨著培養(yǎng)時(shí)間的增長和傳代次數(shù)的增加,細(xì)胞表達(dá) alp h a-SM A ,而不再表達(dá) D esmin,說明細(xì)胞活化。提示 PSC 接種 24h 后即啟動(dòng)了激活過程,至培養(yǎng)第 6d 大多數(shù)細(xì)胞激活,傳代后細(xì)胞處于高度激活狀態(tài)。原代胰腺星狀細(xì)胞可作為慢性胰腺炎新藥的細(xì)胞 篩選模型,目前研究發(fā)現(xiàn):胰腺受損時(shí),在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細(xì)胞活化,導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)、功能發(fā)生變化,促使基質(zhì)增生、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積。


細(xì)胞特性
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常胰腺組織。
2)細(xì)胞鑒定:結(jié)蛋白(Desmin)或者平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式:多角型或星型細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。


質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng) 基 : 含 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin 等
換液頻率 : 每 2-3 天換液一次
生長特性 : 貼壁
細(xì)胞形態(tài) : 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 : 可傳 3-5 代
傳代比例 : 1:2
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%


該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。


注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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