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產(chǎn)品中心

當前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細胞原代細胞復蘇/凍存大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞
大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞

產(chǎn)品簡介

大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞分離自股骨、脛骨。骨內(nèi)膜是一層致密結(jié)締組織膜,覆蓋在骨的表面(關節(jié)面除外) ,新鮮骨內(nèi)膜呈粉紅色,含有豐富的血管、神經(jīng)和成骨細胞。

產(chǎn)品型號:復蘇/凍存
更新時間:2025-07-01
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪問量:514
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大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞

產(chǎn)品名稱 :大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB1186h

組織來源 :股骨、脛骨

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介:

骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞分離自股骨、脛骨。骨內(nèi)膜是一層致密結(jié)締組織膜,覆蓋在骨的表面(關節(jié)面除外) ,新鮮骨內(nèi)膜呈粉紅色,含有豐富的血管、神經(jīng)和成骨細胞。此外,附著于骨的肌腱、韌帶于附著部位都與骨內(nèi)膜編織在一起。因而骨內(nèi)膜與骨質(zhì)結(jié)合甚為牢固。骨內(nèi)膜富含血管、神經(jīng),通過骨質(zhì)的滋養(yǎng)孔分布于骨質(zhì)和骨髓。骨內(nèi)膜分內(nèi)、外兩層,外層主要是粗大的膠原纖維束,部分纖維穿入骨質(zhì),使骨內(nèi)膜固定于骨面。內(nèi)層疏松,含成骨細胞和破骨細胞(分別具有產(chǎn)生新骨質(zhì)和改建骨的功能) 。

骨髓腔和骨松質(zhì)的網(wǎng)眼也襯著一層菲薄的結(jié)締組織膜,叫做骨膜。骨內(nèi)膜的內(nèi)層和骨膜有分化成骨細胞和破骨細胞的能力,以形成新骨質(zhì)和破壞、改造已生成的骨質(zhì),所以對骨的發(fā)生、生長、修復等具有重要意義。骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞是一種具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細胞。骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞的體外培養(yǎng)條件要求較高,在培養(yǎng)過程中,受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH 值等條件的影響。


質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態(tài) :成纖維細胞樣
傳代特性 :可傳5代左右。3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶

培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%



該細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。



客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術部溝通。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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