土壤銨態(tài)氮試劑盒說明書

發(fā)布時(shí)間：2023/9/21

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土壤銨態(tài)氮試劑盒說明書

微量法 100T/96S

注意：正式測定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義：

土壤中的銨態(tài)氮可被土壤膠體吸附，呈交換性銨狀態(tài)氮肥，也可溶解在土壤溶液中，能直接被植物吸收利用，屬于速效性氮素。

測定原理：

土壤中的銨態(tài)氮在強(qiáng)堿性介質(zhì)中與次氯酸鹽和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚藍(lán)，在 625nm

處有特征吸收峰，吸光值與銨態(tài)氮含量成正比。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：

天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、振蕩儀。

試劑組成和配制：

提取液：液體 110mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：粉劑×2 瓶，4℃避光保存。臨用前根據(jù)用量每瓶加 4mL 雙蒸水溶解，現(xiàn)配現(xiàn)用。

試劑二：液體 8mL×1 瓶，4℃避光保存。

試劑三：液體 2mL×1 瓶，4℃保存。

樣本處理：

按照土壤質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 新鮮土樣，加入

1mL 提取液），振蕩提取 1h，10000g ，25℃離心 10min，取上清液待測。

測定操作表：

1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min，調(diào)節(jié)波長至 625nm，蒸餾水調(diào)零。

2、操作表

	空白管	測定管
樣本（μL）		20
提取液（μL）	20
試劑一（μL）	80	80
試劑二（μL）	80	80
充分混勻，25℃靜置 1h
試劑三（μL）	20	20
充分混勻，于微量石英比色皿/96 孔板中，蒸餾水調(diào)零，測定 625nm 處吸光值 A，分別記為 A 空白管和 A 測定管，△A=A 測定管-A 空白管

計(jì)算公式

a.用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y =0.1522x-0.0009，R2= 0.9993

NH +—N 含量（mg/kg 鮮重）=（△A+0.0009）÷ 0.1522÷W

= 6.57×（△A+0.0009）÷W

W ：樣本質(zhì)量，g

b.用 96 孔板測定的

計(jì)算公式如下：

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.0761x-0.0009，R2= 0.9993

NH +—N 含量（mg/kg 鮮重）=（△A+0.0009）÷ 0.0761÷W

= 13.14×（△A+0.0009）÷W

W：樣本質(zhì)量，g

注意事項(xiàng) ：

1 .試劑一必須避光低溫保存，配制好的試劑一 4℃保存不能超過 20 天。

2. 浸提液最好在當(dāng)日完成測定，如果不能完成，可冷凍保存，但不能超過兩天。